動物源性食品中細菌的檢測——彎曲杆菌

彎曲杆菌屬是一組人畜共患病的病原微生物，其感染在世界範圍內相當普（pǔ）遍。彎曲杆菌從1909年開始（shǐ）在獸醫領域裏被重視。該菌在牛腸道（dào）中最早被發現，以後又在豬、羊、犬、雞及多（duō）種野生動（dòng）物的腹（fù）瀉糞便和正常糞便中檢出，在我國的分布也十分廣泛。該（gāi）菌（jun1）屬有胎兒彎曲（qǔ）杆菌（Campylobacter fetus）、空（kōng）腸彎曲杆菌（Campylobacter jejuni）、唾液彎曲杆菌（Campylobacter sputorum）、結腸彎曲杆菌（Campylobacter coli）和簡（jiǎn）潔彎曲杆菌（Campylobacter concisus）5個正式種（zhǒng），另外還（hái）有5個位置不（bú）定的種，其中包括糞彎曲杆菌（Campylobacter fecalis）。空腸彎曲杆菌過去屬於胎兒（ér）彎曲杆（gǎn）菌的一個亞種，結腸彎曲杆菌過去屬於胎兒彎曲杆菌（jun1）空腸亞種。

空（kōng）腸彎曲（qǔ）杆菌是近（jìn）年來受到各國學者廣泛重視的一種人畜共患病（bìng）的（de）病（bìng）原菌。1984年Simbert等將其列為彎曲杆（gǎn）菌的一（yī）個獨立種，稱為（wéi）空腸彎曲杆（gǎn）菌。早在1957年King就首次發現該菌與人類腸炎的關係，但直到（dào）1977年Skirrow和（hé）1979年Butzler分別利用抑製腸道菌叢的培養基，從而大大提高了糞便中該菌（jun1）的檢出率後，世界各地關（guān）於空腸彎曲杆菌（jun1）的報道才日益（yì）增多。自（zì）1980年起WHO已將空腸彎曲杆菌病列為常見的食源性疾病。但空腸彎曲杆菌並沒有（yǒu）得到足夠的重視，原因在（zài）於該菌所引起的疾病致死（sǐ）率較低，與（yǔ）溫血（xuè）動物有關，該菌與沙門氏菌、大腸杆菌不同，能夠脫離畜主而存活下來，對環境條件極為（wéi）敏感，較易控（kòng）製。最近數（shù）十年，發達國家的空腸彎曲杆菌病的發病人數逐年增長，僅在美國每（měi）年的發病人數就高達250萬人次。空腸彎（wān）曲杆菌因可引起格林-巴利綜合（hé）征（Guillain-Barre syndrome，GBS）而日益（yì）受（shòu）到世界各國科學家的關注。

1 病原學特征

彎曲杆菌屬的細菌（jun1）是一種纖細的、螺旋形、彎曲杆狀的革蘭氏染色陰性菌，也可（kě）出現S形、逗點（diǎn）狀或似飛翔的海鷗（ōu）形，不形成芽孢。一般大小為（0.2～0.8）μm×（0.5～5）μm，也有的有1個以上螺旋並可長達8μm，較長的可有4～5個彎曲（qǔ）。菌體一端或（huò）兩（liǎng）端有單根鞭毛，鞭（biān）毛長度為菌體的2～3倍（bèi），超過48h的培（péi）養物以衰老的球菌狀居多。具有O（菌體）、H（鞭（biān）毛）和K（莢膜）3種抗原。

1.1 空（kōng）腸彎曲杆菌

1.1.1 形態和染色特性

該菌形態特征同屬的描述，一般大小為（wéi）（0.3～0.4）μm×（1.5～3.0）μm，暴（bào）露（lù）於空氣後很快形成球形體。革蘭氏（shì）染色陰性，但（dàn）不易著色，用石炭酸等染色劑或吉姆薩（sà）染色更好。

1.1.2 培養和生化特性（xìng）

在需氧和（hé）厭氧環境中不生長，對微需氧條件要求較高，最適生長的（de）微需氧條件為含5%氧（yǎng）、85%氮和10%二氧化碳的混（hún）合氣體（tǐ）環境。培養適宜溫（wēn）度為42～43℃，最適宜溫（wēn）度為42℃，37℃可生長，30℃以（yǐ）下不生長。可生長pH為7.0～7.9，最適pH為7.2。

該（gāi）菌在雙相培養基中生長良好。常用固體（tǐ）培養基為Skirrow培養基、Butzler培養基和（hé）改（gǎi）良Camp-BAP培養基，我國常用（yòng）Camp-BAP培養基。在（zài）固體培養基上經48h培養後，可形成兩種類型的菌落（luò）：第一型菌落不溶血，灰色，扁平，潤濕，有光澤，看上去像水滴，邊緣不規則（zé），常沿（yán）劃（huá）線（xiàn）生長；第二（èr）型菌落也不溶血，常呈分散凸起的單個菌落（直徑（jìng）1～2mm），邊緣整齊，半透明（míng），有光澤，中心稍混濁。在液體培養基上輕微混濁生長，常有油脂狀沉澱，不（bú）易散開，在麥康凱瓊脂（zhī）上生長微弱或不生長。常用（yòng）液體（tǐ）培養基有改良布氏肉湯（tāng）、硫乙醇酸鈉肉湯。

該菌不（bú）發（fā）酵糖類，不分解尿酸，不液化明膠。甲基紅（MR）試驗、吲哚試（shì）驗均為陰性。

1.1.3 抵抗力

該（gāi）菌對氧敏感（gǎn），故在（zài）外界環境（jìng）中（zhōng）很容易（yì）死亡。對幹燥抵抗力弱。對酸和熱敏感，pH2～3經5min、58℃經5min可滅活。對常（cháng）用消毒劑敏感，如（rú）3%來蘇兒、1%新潔爾滅、雙氯苯雙胍己烷和度米芬等（děng）。經紫外線5min不耐受。

1.1.4 抗原性

具有耐熱的O（菌體）、不（bú）耐熱的H（鞭毛）和K（莢膜）3種抗原。鞭毛軸絲蛋白（bái）是空腸彎曲杆菌的一種共同抗原成分，該抗原（yuán）隻有（yǒu）在酸處理下才顯露出來，具有熱穩定性，其（qí）免疫原性很強；外膜蛋白（bái）也（yě）是引起菌株間（jiān）交叉反應的共同（tóng）抗原成分。該菌的分（fèn）型方（fāng）法較多，主要有依據O抗原的間接血凝分型法（fǎ）和依據H和K抗原的玻（bō）片凝集分型法。

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