時間:2009-11-03 點擊: 次 來源:蜗牛视频app畜牧(mù)網 作者:蜗牛视频app畜牧網 - 小 + 大
摘 要:由於抗菌藥(yào)物的廣泛使用,使很多養(yǎng)殖場的畜禽糞便中長期存在一種或多種抗菌藥物的殘留。畜禽糞便中抗菌藥物殘留不僅對微生態環境造成破壞,而且通過食物(wù)鏈對人體健康造成影響(xiǎng)。有關學者就畜禽糞便中一些抗菌藥物的(de)殘留檢測方(fāng)法(fǎ)進行了相關研究,已報道的有四環素類、大環內酯類(lèi)、氟(fú)喹諾酮類、磺胺類及聚醚類離子載(zǎi)體抗(kàng)生素等,所建立方法(fǎ)都是高效(xiào)液相色(sè)譜檢測法(fǎ)(HPLC)。同時,對有的抗菌藥物還進行了降解規(guī)律和方法的研究,如金黴素、恩諾沙星及鹽黴素等。這些研究將為控製和消除(chú)畜禽糞便中抗菌(jun1)藥物殘留以及促進其循環再利用提供科學依(yī)據。 關鍵詞:畜(chù)禽(qín)糞便;抗菌藥物殘留;檢測方法(fǎ);降解 抗菌藥物在疫病(bìng)防治方麵的良好效果,使得各種抗菌藥物被(bèi)廣泛的應用於動物(wù)疾病治療和預防。抗菌藥物進入畜禽體內(nèi)後,除少部分藥物以原形/或代謝產物方式蓄積於組織、器官以及蛋奶等產品中,50%~90%將以原形化合物或代(dài)謝產物(wù)進入糞(fèn)、尿等(děng)排泄物中[1]。這些有抗菌藥物殘留的糞(fèn)便或者作為有機(jī)肥料被施入農田、菜地,或者被直接排入溝、塘、河流,導致殘(cán)留的抗菌藥物(wù)進入土壤和水體,這將(jiāng)對(duì)環境微生態(tài)產生重大影響,並通過食物鏈影響其中的植物(wù)、動物和微生物的正常生命(mìng)活動,最終將影響人類的健康,其不良後果(guǒ)不容忽視。 長期以來,由於畜禽糞便中抗菌藥物殘留都(dōu)是以慢性和蓄積毒(dú)性[2]的形式對環境和健(jiàn)康產生危害,其危害性具有極大的隱蔽性,未能(néng)引起(qǐ)人們的高度重視。近年(nián)來,隨著人們對食品安全和環保意識的(de)增強,以及對(duì)畜禽(qín)糞(fèn)便無害化處理和循環(huán)再利用研究(jiū)的深入,畜(chù)禽糞便中抗菌藥物殘留的危害性越來越被人們(men)所關注(zhù),對抗菌藥物在畜禽糞便中(zhōng)殘留的檢(jiǎn)測和降解方法的研究也日見增多。 1 四環素類藥物 匡光偉等[3-4]建立了雞糞中金黴素的高(gāo)效液相色譜檢測法(HPLC)。提取液為MCL-Vain-Na2 EDTA液(yè),Oasis HLB型固相萃(cuì)取柱,色譜條件為紫外波長370 nm;流速1.0 mL/min,流動相0.0l mol/L草酸溶液∶乙睛∶甲醇為80∶15∶5 (pH2.5),柱溫30 ℃,線性範(fàn)圍為0.1 μg/mL ~1.2 μg/mL(r>0.999),回收率分(fèn)別(bié)為84%~92%,變異係(xì)數(CV)<9%。同時,他們還研究了(le)雞糞添加金黴素在外界環境的降(jiàng)解動態規律。不同濃度的金黴素,在自然光照條件下,降解都較快,其變化趨勢(shì)符(fú)合一級動力學方程(chéng)Ct=Coe-kt。並由此求得雞糞(fèn)中CTC在自然光照下的降解半衰期為3.24 d±1.02 d。 王冉等[5]建立了(le)豬糞便、豬尿液和雞排泄物中(zhōng)金黴素殘留檢測的(de)HPLC法。畜禽排泄物樣品用提取液(丙酮+水+4 mol/L鹽(yán)酸,體積比為(wéi)13∶6∶1)處(chù)理,色譜條件流動相為0.01 mol/L乙二酸+甲醇(chún)+乙腈(體積比為10∶2∶3),固定相為ZORBAX SB-C18,檢測器波長為375 nm。結果表明,在上述色譜條(tiáo)件下, 0.2 μg/mL ~10.0 μg/mL金黴素標準(zhǔn)溶液的峰麵積與其質量濃度呈線性相關關係(xì)(R2=0.999 9);當(dāng)金黴素添(tiān)加濃度為0.5 mg/kg~5.0 mg/kg時,添加回收率為79.60% ~92.78%,變異係數為3.88% ~10.20%,該方法的檢(jiǎn)測限為0.5 mg/kg。 2 大環內酯類藥物 劉向明等[6]建立了豬(zhū)糞中多拉菌素(DOR)的HPLC檢測方法,DOR在1 ng/mL~200 ng/mL濃度範圍內,標準(zhǔn)曲線的線性回歸方(fāng)程為y=4 800x-6 160(R2= 0. 999 7),檢測限為0. 5 ng/g,定量限為1 ng/g。回收率為66. 6%~102.9%,批內變異係數為1.59%~12.42%,批間變異係數為1.63%~6.20%。並對DOR在豬糞中的排泄(xiè)消除規律進行了(le)初步研究,表(biǎo)明DOR通過頸部肌肉注射無論是低劑量(300 μg/kg)還是高劑(jì)量(1 500 μg/kg),在5 d~7 d均達到排泄(xiè)高峰,DOR消除緩慢(màn),在28 d仍有較大量的藥物排出 (12 ng/g左右(yòu)),且個體差異比較明顯。 Kolar L等[7]建立了檢測綿羊糞便中的阿維菌素和多拉菌素的HPLC法,樣品用乙腈提(tí)取,用(yòng)清潔(jié)型固相萃取(SPE)柱淨化,用(yòng)N -甲(jiǎ)基咪唑溶(róng)液作衍生化試劑,熒光檢測器檢測,檢測限為1 ng/g,定量限為2.5 ng/g,阿維(wéi)菌素的回收率(lǜ)為66.4%~80.8%,多拉菌素的回收率(lǜ)為67.7%~85.5%。 周德剛(gāng)等[8]建立了(le)一(yī)種同時檢測兔排泄(xiè)物中阿(ā)維菌素、伊維菌素(sù)、多拉菌素、愛普菌(jun1)素的HPLC法,樣品用乙腈提(tí)取,Bond Elut C18柱淨化,用三氟乙酸(suān)酐和1-甲基咪唑的乙腈溶液作衍生化試劑,然後加入冰乙(yǐ)酸和三乙胺進行衍生化反應30 min,用液相色譜熒光(guāng)檢測器檢測,該方法檢測兔排泄物在2 ng/g~10 ng/g的添加範圍內,兔糞的平(píng)均回收率73.17%~101.30%,日內變異係數小於11.61%,日間(jiān)變異係(xì)數小於11.3 1%,兔尿的的平均回收率在75.69%~101.84%,日內(nèi)變異係數小於12.20%,日間變異係數小於10.880%,愛普菌素、阿維菌(jun1)素、多拉菌素和伊維菌素在兔糞(fèn)中的檢出限為0.09 ng/g~0.25 ng/g,在兔尿中的檢測限為0.04 ng/mL~0.28 ng/mL。4種藥在兔糞(fèn)便和尿液中的定量限分別是2 ng/g和2 ng/mL。 李(lǐ)存(cún)等[9]建立了檢測豬排泄物中替(tì)米考星殘留的HPLC法。用乙腈和磷酸二氫鉀緩衝液提取,C18SPE柱淨化,甲(jiǎ)醇-乙腈-乙酸銨溶液洗脫(tuō),紫外檢測器(qì)290 nm處檢測,該方法檢測尿液、糞便中替(tì)米考星的定量限分別為0.025μg/mL和0.05 μg/g,檢測限分別為0.012 5 μg/mL和0.025 μg/g。尿液在0.025 μg/mL~2.0μg/mL添(tiān)加範圍內,回收率在83.4%~95.7%之間,日內變異係數在6.6%~8.9%之間,日間變異(yì)係數在6.4%~9.3%之間;糞便在0.05 μg/g~5.0 μg/g添加範圍內,回收率在58.8%~73.9%之間(jiān),日內變異係數在8.7%~12.4%之間,日間變異係數(shù)在9.4%~16.5%之間。 |
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