口岸截獲豬肉腸的主要豬病病（bìng）原（yuán）核酸檢測

摘要（yào）：為了（le）解非法跨境攜帶豬肉腸傳播動物疫病的風險，對北京（jīng）口岸截獲的豬肉腸進（jìn）行8種豬（zhū）病病（bìng）原（yuán）核酸的檢測分（fèn）析。結果顯示:282份（fèn）樣品中，豬圓環病毒2型（xíng）(PCV-2}、豬細小病毒(PPV）、豬偽狂犬病毒（dú）(PRV)以及豬細環病毒1型(TTSuVl)均有檢出；除PRV陽（yáng）性率較低外（wài）(3.9%），其餘（yú）3種陽性率較高，均大於35%。這表明口（kǒu）岸非法攜帶豬肉腸（cháng）存在傳播多種動物疫病（bìng）的風險，提示相關執法邵門應強化口岸動物檢疫，降（jiàng）低（dī）授病傳入（rù）風險（xiǎn）。

根據《中華人民共和國禁止攜帶、郵寄進境（jìng）的動植（zhí）物及其產品名錄》規定，(生或熟)肉類(含髒器類)及其製品，均屬於禁止攜（xié）帶、郵寄進境物。從境外攜帶（dài）的動（dòng）物產品，由於其（qí）原料信息、製作工藝不（bú）明，存在散播動物疫（yì）病風險（xiǎn），一旦接觸易感動物，很有（yǒu）可能引起動物疫情。但近（jìn）年來非法攜帶動物產品屢禁不止，給我國動物疫病防控帶來巨大風險（xiǎn）。隨著（zhe）豬肉及其製品國（guó）際貿易（yì）的發展以（yǐ）及進出（chū）境旅客的非法攜帶，豬病病原跨境傳播風險也隨之加劇。例如從（cóng）2007年開始，非洲豬瘟從撒哈拉沙漠以南傳（chuán）遍整個東歐，2018年又從高加索地區（qū）傳入亞洲多個國（guó）家，引起多國非洲豬瘟（wēn）暴發（fā）和國際貿易限製。此（cǐ）外，近十多年（nián）來，頻發的（de）食品安全問題使（shǐ）得世界各國對食（shí）品安全十分關注。而（ér）一些豬病病原還會引起公共衛生問題，例如2009年的H1N1亞（yà）型豬流感，經溯源（yuán）表明其來源於豬群中流行的毒株。

根據我國與其他國家的雙（shuāng）邊貿易協（xié）定規定，口（kǒu）蹄疫病（bìng）毒(foot and mouth disease virus,FMDV)，豬繁殖與呼吸障（zhàng）礙綜合征病毒（dú）(porcinereproductive and respiratory syndrome disease virus,PRRSV)，豬瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)，豬圓環（huán）病毒2型(porcine circovirus type2,  PCV-2)，豬流感病毒(swine influenza virus,SiV，豬細小病毒(porcine parvovirus,  PPV，偽狂（kuáng）犬病毒(pseudorabies virus,  PRV)，豬細環病毒1型和2型(torque teno sus virus 1 and 2 ,TTSuVl and TTSuV2) 8種病毒，被列為進出境可能通（tōng）過豬肉傳播的檢疫對象。FMDV, CSFV和PRRSV為可嚴重危害養殖業的（de）重大疫病，已被世界各國列為重點防（fáng）控對象。而SIV, PRV, PCV-2,PPV以及TTSuVl和TTSuV2為分（fèn）布範圍較廣的病原，從肉製品中檢出的（de）可（kě）能性較高。為了解非法跨境攜帶豬肉腸傳播動物疫病的風險，從而為執法（fǎ）部門的（de）監督管理提供數據支持，本文以北京口岸截獲的豬肉腸為研究對象（xiàng），選取282份樣品進行了8種豬病病原核酸的檢測分析。

1 材料與方法

1.1樣品

樣品均為口（kǒu）岸截獲的豬肉腸核酸樣品，-80°C冰箱保存。按照豬肉腸接收時（shí）間（jiān）將（jiāng）樣品分（fèn）為“前段  (  2018年11-12月)、中段(2019年1-2月)和末段(2019年3-4月)”，從每個時間段樣品中隨機抽取94份，共抽取282份核酸樣品。樣品（pǐn）主（zhǔ）要來自25個國家（jiā）的航班，其中歐洲（zhōu）16個（gè）、非（fēi）洲7個（gè）、亞洲2個（gè），另有3份樣品來源國未知。具體（tǐ）豬肉腸（cháng）樣品來源信息見表1。

表1 豬肉腸樣品來源信息統（tǒng）計

1.2 設備與試劑

熒光PCR儀、Roche 480:美國Roche公司產品;AB QuantStudioTMS:美國Thermo Fishe:公司產品（pǐn）;病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒:天根（gēn）生化科技有限公司產品;引（yǐn）物（wù）、探針:生工生物工程股份有限公司（sī）合成;M-MLV反轉錄（lù）酶、RNA酶抑製劑:Promega公司（sī）產品;Ex Ta獷Hot StartVersion,  dNTP;  TaKaRa公司產品。

1.3 檢測方法

8種病原的檢測方法主要是熒光PCR、熒光RT-PCR，均依據相關國際/國家標準或規（guī）範進行，具體見表2。

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