動物源性食品中細（xì）菌的（de）檢測——布魯氏菌（jun1）

布魯氏菌又稱布氏杆菌，早在1886—1887年英國醫生David Bruce指出人（rén）的馬耳他熱（Malta fever）是（shì）由一種微小的細菌（jun1）所致的疾（jí）病以後，1897年丹（dān）麥學者Bong和Stribolt從流產奶牛的子宮分泌物和胎膜中分離到牛種布魯氏菌。1914年美（měi）國學者Traum在豬的流產材料中分離到相似的病原菌。1918年Evans在研究牛、羊流產病原菌的培養物的（de）過程中發現兩者在形態和培養特（tè）性上極為相似，同時又發現它們之間有抗原交叉反應性（xìng）。之後經（jīng）過Meyer等的研究，到1920年根據（jù）兩菌（jun1）的共同屬性（xìng）將其歸為同（tóng）一種屬，為了（le）紀念（niàn）首次分離病原菌者的功績，決定（dìng）命（mìng）名為布魯氏菌。之後學者相繼在綿羊、沙林（lín）鼠和犬等動物體內（nèi）分離到布魯氏菌。布魯氏菌屬細菌是（shì）一類革蘭氏染色陰（yīn）性的短小杆菌，牛、羊（yáng）、豬等動物最易感染，以生殖器官、胎膜發炎和關節炎，引起母畜傳染性流產、不（bú）孕不（bú）育和公畜睾丸炎（yán）為特征。人類接觸帶菌動物（wù）或食用病畜肉及其乳製品均可被感（gǎn）染。

1 病原學特征

1.1 形態和染色特性

在光學（xué）顯微鏡下，布魯氏（shì）菌屬細菌呈球形、球杆形或短杆形，初次分離培（péi）養時多為（wéi）小球杆狀。菌體大小一般在（0.5～0.7）μm×（0.6～1.5）μm，多單個存在，很少成雙、短鏈或小堆狀。不形成芽孢（bāo）和莢膜，偶爾（ěr）有類似莢膜樣的結構（gòu），無鞭毛，不運動。可被堿性染料著色，革蘭氏染色陰性，吉姆薩染色呈紫（zǐ）色。

在電鏡下觀察時，菌體表麵呈腦回狀（zhuàng），菌體可見三（sān）層（céng）細胞壁，外層為脂多糖成分，中層為硬質細菌壁，內層為軟質胞漿（jiāng）膜。

1.2 培養和生化特性

該屬細菌為專（zhuān）性需氧菌，能在弱酸或弱堿性培養基上生（shēng）長繁殖（zhí），也可在普通培養基上（shàng）生長（zhǎng），但不旺盛。而且許多菌株，尤其是（shì）在初次分（fèn）離培養時，尚需在5%～10%二氧（yǎng）化碳環（huán）境中才能（néng）生長。最適生長（zhǎng）溫度為37℃，最適的pH為6.6～7.4，營養要求高，生長時需硫胺素、煙酸和生（shēng）物素（sù）、泛酸鈣等（děng），實驗室常用肝浸液培（péi）養基（jī）或改良厚氏培養（yǎng）基。該菌生長緩慢，培養48h後才出現透明的小菌落，雞胚培養也能（néng）生長。

在液體培養基中呈輕微渾濁生長（zhǎng），無（wú）菌膜。但培養日久可形成菌環，有時形成（chéng）厚的菌膜。在固體培養基上，該菌有光滑型（S）和粗糙型（R）兩種菌落。S型菌落無色透明、表麵光滑濕潤、有光澤，透光呈淡黃色或側光呈現輕微乳色或略帶藍灰色，菌落大小不等，一般直徑為（wéi）0.5～1.0mm，小者0.05～0.1mm，大者3～4mm。R型菌（jun1）落不太透明，呈多顆粒狀，表麵灰暗，顏色有無光（guāng）澤白色、淡黃白色或淺黃色到褐（hè）色，易碎或不易從培（péi）養基表麵刮淨。有時在培養基中還可出現一些過渡類（lèi）型的菌落。綿羊和犬的布魯（lǔ）氏菌是天然的R型種別，其他種為S型，布魯氏菌最常見的變異（yì）是S→R變異，此種變異很（hěn）少（shǎo）發生回變。

該菌觸酶試驗陽（yáng）性，氧化酶試驗通常（cháng）為陽性（xìng），不（bú）水解（jiě）明膠或濃縮血清，不溶解（jiě）紅細（xì）胞，吲哚、甲基紅試驗和VP試驗陰性，石（shí）蕊牛乳（rǔ）無（wú）變化，不（bú）利（lì）用（yòng）檸（níng）檬酸（suān）鹽。綿羊（yáng）布魯氏菌不水解或遲緩水解尿素，其餘（yú）種均可水解尿素。除綿羊（yáng）布魯氏菌和一些犬種布魯氏菌菌株外均（jun1）可（kě）還（hái）原硝酸鹽和亞硝酸鹽。沙林鼠布魯氏菌在常規腖（dòng）水培（péi）養基中可由葡萄糖、半乳糖、阿拉（lā）伯（bó）糖（táng）和木糖產酸而不產氣。

1.3 抵抗力

本菌對外界（jiè）自然環境的抵抗力較強，在糞便中可存活120d，汙染的土壤和水中中可存活1～4個月，在鮮（xiān）乳中可（kě）存活3～15d，乳和肉食品（pǐn）中約（yuē）存活（huó）2個（gè）月。低溫下（xià）可存活1個月左右，冰凍狀態下可存活數月（yuè）。

該菌對理化因素比較（jiào）敏感（gǎn）。在日光直射或幹（gàn）燥條件下抵抗力（lì）較弱，在腐敗的屍體中很（hěn）快死亡。一般在直射光作（zuò）用下10～20min死（sǐ）亡。該（gāi）菌對濕熱很敏感，50～55℃60min內死亡；60℃30min內死亡；70℃10min內（nèi）死亡；巴氏消毒法可以殺滅該菌，高壓消毒可使（shǐ）該菌瞬間死亡。該菌在自然界的（de）生存力受氣溫、濕（shī）度、pH影響較（jiào）大，pH7.0及低溫下存活時間較長。該菌對消毒劑較敏感，2%來（lái）蘇（sū）兒、石炭酸（suān）、氫氧化鈉溶液可（kě）在1h之內殺死細菌；5%的（de）新鮮石灰乳2h、1%～2%的甲醛3h即可將其殺死；0.5%雙氯苯雙胍己烷、度米芬、消毒淨或（huò）新（xīn）潔爾滅5min內即可殺死該菌。該（gāi）菌對（duì）四環素最敏感，其次是（shì）鏈黴素和土黴素，但對杆菌肽、多黏菌素B和多黏菌素M、林可黴素有（yǒu）很強（qiáng）的抵抗（kàng）力。

1.4 生物（wù）型和抗原性

1970年聯合國糧食及農業組織（FAO）/WHO布魯氏菌病專家（jiā）委員會把布（bù）魯氏菌分為6個生物種、20個生物型，即馬耳他布（bù）魯氏菌（Brucella melitensis）生物型1～3、流產布魯氏菌（Brucella abortus）生物型1～9、豬布魯氏菌（Brucella suis）生物型1～5、綿羊布魯氏菌（Brucella ovis）、沙林鼠布魯（lǔ）氏菌（Brucela neotomae）和犬布魯氏菌（Brucela canis）。布魯氏菌抗（kàng）原結構非常複雜，目前可分為屬內抗原和屬外抗原。

首頁前一頁123456後一頁（yè）尾（wěi）頁