看精準檢（jiǎn）測如何為動物疫病防控淨化強基？

近日，農業農村部公布了2024年度農業“火花技術”培育（yù）名單，共有30項成果入選農業“火花技術”成果庫，其中揚州大學獸醫（yī）學院朱國強教授課題組研發的“抗原表位決（jué）定簇直（zhí）接介導的免疫檢測技術平台”榜上有名。既是技術，又是平台，更（gèng）是一種基（jī）於精準檢測的綜合解決方案，其正在我國動物（wù）疫病防控與淨化（huà）工作（zuò）中燃起星（xīng）星之火。

診斷清楚、治療明白、免疫有（yǒu）數、淨化根除是動物疾（jí）病防控的整體思路與（yǔ）策略。然而，傳統的免疫學檢測方法由於存在特異性差、敏感性低、操作成本高等瓶頸，掣（chè）肘畜禽重要疫病早期診斷預警、病原流調溯源、針對性高效防控的施展，亟待（dài）破題。

經過多年的研究、實（shí）踐，揚州大學朱國強教授課題（tí）組創製了抗原表位決（jué）定簇直接介導的（de）免疫檢測技術。此項技術將抗原表位決定簇通過生物惰性（xìng）載體多級放（fàng）大，從源頭上提高免疫檢測技術的特異性和敏感性，是一項便捷、即（jí）時、經濟、特異和敏（mǐn）感（gǎn）的多病原感染檢測監測（cè）和（hé）疾病淨化的創新性平台。該項技（jì）術被列為（wéi）科技部2021年度全國顛覆（fù）性技術創新大（dà）賽優秀項目，2020年至今授權美國、英國發（fā）明專利各1項，技術平台的專利池（chí）技術內授（shòu）權國家發明專利24項。

特異精準：顛覆傳統免疫學檢測技術策略

傳統免疫學檢測方法采用完整蛋白質作為（wéi）檢（jiǎn）測（cè）抗原，而事實上完（wán）整蛋白質中參與抗原（yuán）-抗體反應的優勢抗原表位占比較少，剩餘的大部分結構不僅在免疫應答（dá）反應中是冗餘的，且會造成背景反應（yīng）、交叉免疫反應和無法控製（zhì）的非特異性反應（yīng），製約免疫學檢測技術（shù）的特（tè）異性。為了克服上述（shù）難題，朱國強教授課題組采用“精準抗原表位”策略，利用抗（kàng）原表位（wèi）替代完整蛋白質作為檢（jiǎn）測抗原（yuán），消除了冗餘（yú）組分造成（chéng）的（de）幹擾。

“我們將（jiāng）真正參與反應的抗原表位從完整蛋白質上麵‘剝離’下（xià）來，基（jī）於生物惰性載（zǎi）體和延伸（shēn）載體進行展示。”課題組段強德教（jiāo）授解釋道：“在檢測時生物惰性載體和延伸載體（tǐ）作（zuò）為對照係統，在此基（jī）礎上，僅展示畜禽病原的抗原表位後作為檢測（cè）係統，當樣品與對照係統不反（fǎn）應，與檢測係統反應，就可以（yǐ）精準診斷為對應病原的感染。因此（cǐ），該平台技術方法應該可以實施明確的（de）、精準的診斷。”

傳（chuán）統的免疫學檢測方法（fǎ）由於固相載體支持介質承（chéng）載蛋白（bái）質抗原量的有限性，局（jú）限（xiàn）了檢測方法的敏（mǐn）感性。敏感性與有效抗原數量直接相關，因此，如何有效（xiào）大幅度提高抗（kàng）原特異性（xìng）識別反應量是突（tū）破免疫學檢測方法敏感（gǎn）性局限的技術關鍵。

“我們提高敏感性的方式是通過建立生（shēng）物惰性（xìng）載體﹢延伸載（zǎi）體多級放大展示抗原（yuán）表位的技術，這種展示技術的放大過程類似於大樹（生物惰（duò）性載體）→延伸出樹枝（延伸載體）→延伸出樹梢/樹葉（抗（kàng）原表位），最（zuì）終能（néng）夠讓參與抗原抗體反應的抗原表位的數量達到巨大數量（liàng）級放（fàng）大。”課題（tí）組高（gāo）級實驗師羊揚（yáng）闡述。

就目前基於信號放（fàng）大（dà）的免疫血清（qīng）學技術而言，特異性和（hé）敏感性往往與檢測用時（shí）成正比，例如（rú）CLIA、ELISA等敏感性較高的（de）血清學技術的用時大約為2-3小時（shí）。然而，從免疫學原理的角度分析，抗原與抗體的結合反應（yīng）是瞬間即時發生的，孵育太久容易導致非特異性反應（yīng）放大。在探究如何破解免疫學（xué）檢測方法敏（mǐn）感性局（jú）限的同時，朱（zhū）國強教授（shòu）課題（tí）組也在不斷嚐試如何實現快速、便（biàn）捷的檢（jiǎn）測技術，不用受限（xiàn）於實驗室條件，讓疾病監測日常化、家庭化。

目前朱國強教授課題組已（yǐ）研發出適用於現場檢測（POCT）的檢測試劑盒，實施檢測和結果判定2分鍾內完成且肉眼（yǎn）可（kě）辨。多次參與臨床現場測試的（de）劉家奇等博士研究生（shēng）表（biǎo）示（shì），該技術特（tè）異（yì）、敏感、易操作、易判別，即便（biàn）是行業外的人也可以（yǐ）通過（guò）說明書使用。

源頭治理：實施畜禽種源性疾病清除淨化

診斷清楚才（cái）能治療明白，淨（jìng）化根除也才能有的（de）放矢。

種源性疾病（bìng）是指垂直傳播性疾（jí）病，在家畜家禽中種類多樣且嚴重影響製約畜禽生產業發展，例如沙門氏菌病（包括雞白痢、腸炎沙門氏菌）等。針對種源性疾病最好的解決手段就是精準檢測並監測（cè）出在種雞和產蛋雞內自身存在的種源性疾病病原，而最（zuì）關鍵的一點就是（shì）需要特異、敏感和精準便於操作的免疫學檢測技術。通過精準檢測，把感染的種禽類（lèi）精準篩查出來並淘汰（tài），在禽類第一代、第二代雛雞開始，體內就不存在種源性（xìng）疾病病原，達到完全清除種源性疾病。

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