金顏輝（huī）*1 黃盛興2 黃雁1
（1 福建省動物疫病預（yù）防控製中心 350003；
2 建甌（ōu）市小鬆鎮畜牧獸醫站 353111） 摘要：一組實（shí）驗豬（zhū）場應用PRRS滅活疫苗免疫豬場生（shēng）豬，采集同一份豬血清（qīng）ELISA試（shì）劑盒檢（jiǎn）測，測不出免疫抗體（0∕14），金標檢（jiǎn）出陽性率（9∕14）64.28％；另一組用（yòng）進口減毒活苗免疫的同一份豬血清ELISA檢（jiǎn）出（chū）陽性數百分百（bǎi）（16∕16），金標檢不出（0∕16）。另一實驗豬場滅活苗兩次免（miǎn）疫，金標檢出陽性率（16∕21）76.19％，ELISA檢不（bú）出（chū）；活疫苗兩次免疫， ELISA檢出陽性率（16∕21）76.19％，金標檢不出。結論不同疫苗免疫效（xiào）果，用不同檢測方法，結果差異很大。
關鍵詞：豬藍耳病，抗體，監測
豬繁殖與呼吸綜合征（zhēng）（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由PRRSV引起的一種高度（dù）接觸性的傳染病，以引起母豬繁殖障礙、仔豬和育成豬呼吸道症狀及高死亡率為主要特征。該病於1987年首次在北美發現[1]，之後（hòu）在世界範圍內迅速傳播，我國於1996年首次（cì）分離到該病毒[2]，最近幾年PRRSV也已（yǐ）成為我國重要的（de）豬傳染病病（bìng）原之一。特別是2006年出現變異毒株後，對我（wǒ）國養豬業造成了更加嚴重的危害和經濟損失[3]。
針對目前我（wǒ）國豬藍耳病疫苗免疫後抗體水平監測中存在的一些問題（tí），我們應用豬藍耳病金標試紙條及進口ELISA試劑盒（hé），對經豬繁（fán）殖與呼吸綜合征滅（miè）活疫苗（NVDC-JXA1株）和進口減毒活疫苗免疫後采集的豬血清進行比對（duì）實驗。
免（miǎn）疫程序為： 18日齡分兩組免疫，滅活疫苗組免疫20天後采血清樣檢測（cè），同一份血清檢（jiǎn）測結果：滅活苗免疫組ELISA檢測（cè）血清抗體滴度檢不出（0∕14），金標檢（jiǎn）出陽性率（9∕14）64.28％；進口減毒活疫苗用同樣免疫（yì）程序，采血清樣檢（jiǎn）測ELISA檢出陽性率百分百（16∕16），金標檢（jiǎn）不出。另一豬場實驗結果：免疫程序為（wéi） 疫苗兩次免（miǎn）疫間隔兩周，二免後28天采血樣檢測，滅活疫苗免（miǎn）疫的ELISA檢不出（0∕21），金標檢出陽性率（16∕21）76.19％，活苗免疫的ELISA檢出陽性率（16∕21）76.19％，金（jīn）標（biāo）檢不出；金標檢測中的3份陰性ELISA檢測是陽性， ELISA檢測中（zhōng）的3份陰性金標檢測是陽（yáng）性。
1 材（cái）料與方法
1.1 材料
選取兩處健康豬場，經豬藍耳病弱毒疫（yì）苗及滅活（huó）疫苗免疫後，采血，按常規方法分離血（xuè）清（qīng），備檢。
1.2 試劑盒
豬藍耳病抗體檢測試劑盒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Antibody Test Kit）購自IDEXX公司；豬藍（lán）耳病金標試（shì）紙條來自（zì）本中心福建省科技廳（2007）重大科技項目專題二“福建省（shěng）畜禽重大（dà）疫病診（zhěn）斷及防治技（jì）術研究”課題組提供。
1.3 操作步驟
1.3.1 ELISA試劑盒：按試劑盒說明書，應用豬藍耳病抗體檢測試劑盒（hé）對采集（jí）的豬血（xuè）清進行抗體檢（jiǎn）測，步驟如下：血清用樣品稀釋（shì）液進行40倍稀釋，濃縮洗液恢複到室溫後混勻並用（yòng）去離子水做10倍稀釋。在試劑盒自帶96孔板的C1、D1、C2、D2中加入100ul未稀釋的陰性對（duì）照樣品，在A1、B1、A2、B2孔中加入100ul未稀釋的陽性對照樣品，被檢樣品（pǐn）各加兩孔，每孔100ul。室（shì）溫孵（fū）育30min，甩去液體，每孔用洗液300ul清洗3-5次。每孔加入100ul酶標抗體，室溫孵育30min。甩去液（yè）體，每孔用洗液300ul清洗3-5次。每孔加入100ul TMB底物溶液，室溫孵育15min。加入100ul終止液並讀取OD650nm。按試劑盒給定計算公式進（jìn）行判（pàn）定。
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