磺胺（àn）類藥物殘留檢測技術

時間：2010-06-04 點（diǎn）擊：次來源：蜗牛视频app畜牧網作者：蜗牛视频app畜牧網 - 小 + 大

1、技（jì）術簡介
磺胺類藥物（Sulfonamides, SAs）是指（zhǐ）具有對氨基苯磺酰胺（àn）結構的一（yī）類（lèi）藥物的總稱，是一（yī）類用於預防和治療細菌（jun1）感染性疾（jí）病的化（huà）學治療藥物（wù）。SAs種類可達數千種，其中應用較廣並具有一定療效的就（jiù）有幾十種。通過任何途徑攝入的SAs會在人體中蓄積（jī），導致（zhì）許多細菌產生抗（kàng）藥性，對人類的（de）身體健康產生很大的危害。國際食品法典（diǎn）委（wěi）員（yuán）會（CAC）和歐美等大多（duō）數國家規定（dìng）食品和飼料中的SAs總量及磺（huáng）胺（àn）二甲基嘧啶等（děng）單個SAs的（de）含量不得超過0.1毫克/千克。日本規定食品中不得檢出SAs。
本技（jì）術用於檢測可食性（xìng）動物組織中（zhōng）七種常見的SAs。可食性組織樣品經乙（yǐ）腈提取，正幾烷分配，再經堿性氧化鋁SPE柱淨化（huà），用反相高效液相（xiàng）色譜-紫外檢測（cè）器在270nm檢測。可靠的方法檢測下限為0.05毫克/千克，樣品處理過程簡單、快速、靈敏，易於掌握。
2、應用條件
本（běn）項技（jì）術應用範圍是在實驗室裏對可食性動物組織（肉、肝、腎、脂肪、皮等）中七種或單（dān）個SAs（磺胺嘧啶SD、磺胺間甲氧嘧啶SMM、磺胺間二甲基嘧啶SM2、磺胺間甲惡唑SMZ、磺胺二（èr）甲氧嘧啶SDM、磺胺間惡喹啉SQ、磺胺間甲氧嘧啶SMM、磺胺甲氧嗪SMP）的高（gāo）效液相色譜測定方法。實驗室（shì）須具備高（gāo）效液相色譜儀（帶紫外檢測器）以及實驗室常見的小型樣品處理設備和試劑。同時具有一定分析化學專業知識背景、並能夠比（bǐ）較熟練操作儀器設備的（de）技術人員。
3、工藝流程
樣品製（zhì）備 -----> 解凍 -----> 粉碎 ------> 均分
樣品處理 -----> 提取（qǔ） -----> 淨化-----> 濃縮-----> 溶解
樣（yàng）品檢測 -----> 參數設定 ----->進樣 -----> 數據處理
4、操作規程
4.1試劑和材料
4.1.1試劑：甲醇（色譜純）；乙腈（色譜純）；正己烷（分析純）；正丙醇（分析純）；磷酸（分析純）；無水硫酸鈉（分析純）；堿性氧化鋁SPE柱；磺胺藥物標準品（大於99%）；
4.1.2設（shè）備：高（gāo）效液相色譜儀，配紫外檢測器；渦動混合器；離心機；電子天（tiān）平；旋轉蒸發儀；震蕩器；組織勻漿（jiāng）機。
4.2提取
準確稱取5.00克組織樣品勻漿物，置於（yú）50mL聚丙烯（xī）離心（xīn）管中，加無水硫（liú）酸鈉4.0克和乙腈25mL,勻漿後，以3000r/min的速度離心5min。分離後的殘渣再（zài）加入25mL乙腈，震蕩10min後，以3000r/min的速度離心5min。合並兩次上清液，加入（rù）30mL 正己烷，震蕩10min後，以3000r/min的速度離心5min，取下層液體（tǐ）置於雞心瓶中，加入10mL正丙醇, 混合後50℃下減壓幹燥，用3mL乙腈-水（95+5,v/v）溶解殘留（liú）物。
4.3淨化
上述樣品通過堿性氧化鋁SPE柱，不（bú）收集，用5mL乙腈-水（95+5,v/v）洗滌雞心瓶，過SPE柱，吹去（qù）柱內滯留的液體。用10mL乙腈-水（70+30，v/v）洗脫後（hòu），洗脫液中加入5mL正丙（bǐng）醇，50℃下減壓幹燥後（hòu），殘留（liú）物用2.0mL流動相溶解，用高（gāo）效液相色譜儀進行檢測。
4.4檢測
4.4.1檢測條件：
色譜柱：C18柱（zhù），250mm╳4.6mm i.d.；
流動相：乙腈-甲（jiǎ）醇-水-乙酸（2+2+9+0.2）；
流速：1.0mL/min；
檢測波長：270nm；
進樣量：20mL；
4.4.2樣品測定：
分別取適量（liàng）的標準溶液和試樣溶液（yè），做單點或多點校準，以色（sè）譜峰麵積定（dìng）量（liàng）。標準（zhǔn）工作液和試樣中SAs類藥（yào）物的響應值均應在儀器檢測的線性（xìng）範圍之內。試樣液測定的過程中要參插注入標準工作液，以便（biàn）準確定量。
4.4.3空白實驗
除不加試樣（yàng）外，均按上述測定步驟進行。
4.4.4計算
按下式計算試樣中SAs類藥物殘留（liú）量：
C ╳ V
X = ——————
M

式中：X——試樣中SAs殘（cán）留量（mg/g）；
C——試樣液中對應的SAs濃度（mg/mL）；
V——試樣（yàng）總體積（mL）；
M——組織樣品重量（g）。
注：計算結果需扣除空白（bái）值，測定（dìng）結果（guǒ）用平行測定的算術平均（jun1）值表示（shì），保留小數點後兩位。

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