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新疆伊犁州首起牛結節性皮膚病疫情的診斷及處置(圖)

時間:2021-04-06    點擊: 次    來源:中國(guó)動物檢(jiǎn)疫(yì)    作者:馬曉豔(yàn),王文 - 小 + 大

摘要:2019年8月,在新疆伊(yī)犁州察布查爾(ěr)縣、伊寧市、霍城縣的牛群中發現牛皮膚上長滿大小不等的腫(zhǒng)脹結節, 伴有體(tǐ)溫升高等臨床(chuáng)症狀,並有1 頭(tóu)牛死亡。隨後專家趕赴現場開展臨床診斷和流行病學調查。根據病牛臨(lín)床(chuáng)症狀和剖檢變化,初步判定為牛(niú)結節性皮膚病(LSD);采集發病牛樣品,包括各種皮膚結節和(hé)血清,並采集(jí)肺髒、脾髒、淋巴結等髒器,送至省級實驗室(shì)開展病原學、血清學檢測,同(tóng)時送至國家外來動物疫病研究中心確(què)診。省(shěng)級實(shí)驗室熒光 PCR 檢測(cè)顯示,發病牛樣品為(wéi)LSD 病毒核(hé)酸陽性 ;ELISA 檢測顯示,有16 份牛血清LSD病毒抗體陽性。經國(guó)家外來動物疫病研究中心檢(jiǎn)測,送檢的疑似病料確診(zhěn)為LSD 病毒核酸陽性,這是我國首起LSD 疫情。通過做好疫源追蹤、消毒滅源、疫情解封風險評估,同時在新疆伊犁州使用山羊痘疫苗緊急免疫防治(zhì)LSD,後期持續臨(lín)床(chuáng)監測顯示沒有新的疫情發生。

牛結節性皮膚病(lumpy skin disease,LSD)又稱(chēng)牛疙瘩皮膚病、牛結節疹,是由牛結節性皮膚(fū)病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)引起的牛的(de)一種急性(xìng)、亞急性或慢性傳染(rǎn)病。世界動物(wù)衛生組織(OIE)將其(qí)列為須通報動物(wù)疫病,我(wǒ)國在《中華人民共和國進境動(dòng)物檢疫疫病名錄》中將其列為(wéi)一類傳染病。患病牛是該病的主要(yào)傳染源(yuán),病毒存(cún)在於病牛的皮膚結節、肌肉、血液、內髒、唾液、鼻腔分泌(mì)物及精液(yè)中。病(bìng)牛恢複後常帶毒 3 周(zhōu)以上。

LSDV 還(hái)可以通過蚊子、蒼蠅等節(jiē)肢(zhī)動物機械性傳播,也可通過飲水、飼料或(huò)直接接觸而傳播,在蚊蟲活(huó)躍(yuè)時期由其引起的發病概率會明(míng)顯增高。2019 年8月,新疆伊犁州察布查爾縣、霍城縣、伊寧市陸續有獸醫報告發現,多個場點的牛皮膚、乳頭、睾丸、鼻腔、口腔等部位長(zhǎng)有大小不等的疙瘩。臨(lín)床排查發現,累計 3 個(gè)縣(市)的 17個鄉(xiāng)鎮發(fā)生上述情況。初步臨床診斷後(hòu),采集(jí)特征性病變的牛皮膚結(jié)節(jiē)及(jí)病死(sǐ)牛組織(zhī)髒器開(kāi)展實驗室檢測,並將樣品(pǐn)及時送至中國動物衛生與流行病學中心國(guó)家外來動物疫病研(yán)究中心診斷,最終確定病原為LSDV。截至8月13日,伊犁州畜牧獸醫部門累計排查活牛67.14 萬頭。共有 504 頭牛相繼發病,並伴有持續高燒,其中死亡1 頭,發(fā)病率(lǜ)為17.83%(1/2 826),病死率為0.20%(1/504)。發病牛以(yǐ)母牛(niú)居多,不同年齡的牛(niú)均有(yǒu)發病,懷孕病牛未見(jiàn)流產情況。這是我國首起(qǐ)LSD 疫情,本文介紹了該(gāi)疫情的診斷及處置情況,以期為 LSD 防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 主要儀(yí)器設備

高(gāo)速八(bā)維旋轉組織研磨(mó)儀,購自德國Bertin 公司;核酸提取儀NP968,購自西安天隆有限(xiàn)責任公司;熒光PCR 儀(yí)QuantStudio 5,購(gòu)自 ABI 公(gōng)司;離心機,購(gòu)自Sigma 公司;生物安全櫃,購自上海(hǎi)力申科學儀器有限公司;冰凍切片機,購自萊(lái)卡公司;超(chāo)薄切片機,購自LKB 公司。

1.2 主要試劑

LSDV 特異性引物(wù)、熒光標記探(tàn)針、陽性 /陰性對照,由中國動(dòng)物衛生與流行病學中心提供;DNA 病毒熒光 PCR 反 應 液( 生產批號 YDNA20190401),購自哈(hā)爾(ěr)濱世紀元亨公司;羊痘 / 牛結(jié)節性皮膚病雙抗原夾心ELISA 試(shì)劑盒(hé)(生產批號 E83),購自法(fǎ)國IDVET 公司。

1.3 樣品采(cǎi)集

采集3頭發病牛樣品共58份,包括皮膚、睾丸(wán)、乳頭等部位(wèi)結節和病死牛肺髒、脾髒(zāng)、腎髒、淋巴結等髒器的12 份病原樣品以及46 份血清樣品。對(duì)采集的(de)樣品(pǐn)開展實驗(yàn)室檢測,同時送至國家外來動物疫(yì)病研究中心檢測。此外,LSD 疫情(qíng)解封(fēng)時,按照 30% 的比例全(quán)覆蓋抽樣,采集牛全血(xuè)樣本 833 份及蚊蟲樣品5 袋。其(qí)中察布查(chá)爾縣共有15 個鄉(xiāng)鎮和1 個牧(mù)業公司,陽性同(tóng)群牛2 635 頭,另采集其中2個鄉鎮的蚊蟲5 袋;伊寧市(shì)3個鄉鎮,陽性同群牛144 頭;霍城縣2個(gè)鄉鎮,陽性同群牛47 頭。3個疫區共采樣743 份抗凝血;同時(shí)3個受威脅區的規模場及散養戶進行同樣數量的抽樣監測,昭(zhāo)蘇縣采集1 個鄉鎮(zhèn)4 個(gè)村,鞏留縣1 個鄉鎮5個村,特克斯縣采集2個鄉鎮,3 個(gè)受威脅區各采集 30 份抗凝血共 90 份。

1.4 組織病理學檢查

切取一塊 2.0 cm×2.0 cm×0.3 cm 大小, 並經病(bìng)原學檢測(cè)為陽性的樣品,以10% 甲醛和95%乙醇固定,經各種濃度乙醇脫(tuō)水2 h;二甲苯透明處理,將透明好的組織塊放入石蠟(là)中包埋;修整蠟塊後切片,將切好的組織蠟片用眼科鑷平(píng)鋪在40~45 ℃的(de)水麵上;用載玻片(piàn)撈(lāo)取後,傾去餘水,再置入60~65 ℃恒溫箱內烤片,最後進行 HE 染色和封片。

1.5 血清學檢測

通過檢測牛血清中LSD 病毒抗(kàng)體來(lái)判定是否感染。根據羊痘 / 牛結節性皮膚病雙抗原夾心ELISA 試劑盒的規程進行操作,檢測牛血清中LSD病毒抗體,共檢測牛血清46 份。

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