獸藥中非法（fǎ）添加（jiā）藥物快速（sù）篩查法（fǎ）

獸藥中非法（fǎ）添加藥（yào）物快速篩查法

（液相色譜（pǔ）—二極管陣列（liè）法）

1 適用範圍 

1.1 本（běn）方法適用於獸藥及其（qí）原料與輔（fǔ）料中紫外光譜圖庫中所（suǒ）列非法添加（jiā）藥（yào）物的篩查。

1.2 用於紫外光譜圖庫之外的具有紫外吸（xī）收的非法添加藥物的篩查（chá）時，需進（jìn）行空白試驗（yàn）和（hé）檢測限測定，並測定對照品溶液的紫外光譜圖。

2 檢查方法

照高效液相色譜法（《中國獸藥典（diǎn）》一部附錄0512）測定。

2.1 超高（gāo）效（xiào）液相色譜—二極（jí）管陣列法

色譜條件與係（xì）統（tǒng）適用（yòng）性試驗 用（yòng）十八（bā）烷基矽烷鍵（jiàn）合矽膠為填充劑（ACQUITY UPLC HSS T3，1.8 µm，2.1×100mm）；以水-1mol/L醋酸銨溶液（取醋酸銨77g，加水至1000ml，用（yòng）冰醋酸調節pH值至5.0）（99∶1）為（wéi）流動相A，甲醇-1mol/L醋酸銨溶液（99∶1）為流動相B，按（àn）下表進行梯度洗脫；流速0.45ml/min；二極管陣列檢測器（qì），采集波長範圍（wéi）為200 nm～400 nm，分辨率為1.2 nm，提取波長（zhǎng）按需設定（如230 nm、270 nm、最大值圖等）。

供試品溶（róng）液的配製（zhì） 

中藥固體製劑 取50mg，加甲醇10ml，超聲處理10分鍾（必要（yào）時可調整）；

中藥液體製劑（jì） 取10µl ~20µl，加甲醇10ml，搖勻；

化（huà）藥（yào）液體製（zhì）劑 取20µl，加甲醇10ml，搖（yáo）勻；

其他化藥製劑 取50mg，加甲醇10ml，超（chāo）聲處理約10分鍾（必要時可調整），用甲醇稀（xī）釋成含有效成分50µg~100µg /ml的溶液。

對照品溶液的（de）配製（zhì）（紫外光譜圖庫外品種） 用（yòng）甲醇製成50 ~100µg /ml的溶液，溶解性差的（de）對照品，可加適量鹽酸或氫氧化鉀溶液，使其溶解。

測定法 取供試品（pǐn）溶液2 µl注入液相色（sè）譜儀，同時記錄色譜圖（tú）與光（guāng）譜圖。通過與紫外光譜圖庫（kù）中（zhōng）對照光譜圖最（zuì）大吸收波長和圖形的（de）比對（duì），確（què）定供試品中是否（fǒu）含（hán）有相應非法添加藥物。

可根據實驗結果（guǒ）調（diào）整進樣量或（huò）濃度，使紫外光譜圖光滑（huá）、特征清晰。

結果（guǒ）判定

兩者光譜圖無明顯差（chà）異，判為可疑陽性結果。

篩查結果呈可疑陽性（xìng）的樣品，需按農業農村部發布的非法添加檢查方法（fǎ）標準進一步檢驗。

2.2 液相（xiàng）色譜—二（èr）極管陣列法

色譜（pǔ）條件與（yǔ）係統（tǒng）適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑（Alltima C18，5µm，4.6×250mm）；以磷（lín）酸二氫鈉溶液（取磷酸（suān）二氫鈉3.0g，加水1000ml，加三（sān）乙（yǐ）胺0.5ml，用飽和氫氧化鈉（nà）溶液調pH值至（zhì）7.0）∶甲（jiǎ）醇（70∶30）為（wéi）流動相；流速1.0ml/min；二極管陣（zhèn）列檢測器，采集波長範圍（wéi）為200 nm～400 nm，分辨（biàn）率為1.2 nm，提取波長按需（xū）設定。

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