薛青紅,印春生,李寧,支海兵(bīng)* (中國獸醫藥品(pǐn)監察所 國家牛瘟參考實驗室 北京100081) 小(xiǎo)反芻(chú)獸疫(PPR)又名小反芻獸偽牛瘟,是(shì)由(yóu)小反芻獸疫病(bìng)毒引起的一種急性、烈性、接觸性傳(chuán)染病(bìng),易感群發病率高(gāo)達100%,暴發嚴重時死亡率達(dá)100%。目前該病尚無有(yǒu)效治(zhì)療方法,主要通過早期診斷和疫苗免疫進行控製。19世紀40年代該病首次在科(kē)特迪瓦報道以來,先後(hòu)在多個國家暴發和流行。2 007年7月,我國西藏地區先後發生4起PPR疫 情(qíng),感染近5000隻羊 。西藏地區(qū)生活著(zhe)多(duō)種珍稀野生動物,這些(xiē)動物一旦感染PPR,將造成巨大(dà)的損失。 目前我國在新(xīn)疆(jiāng)和西藏地區采用疫苗(miáo)接種的(de)策略(luè)進行該疫病的防控,因此,深(shēn)入開展小反芻獸疫活疫苗的效(xiào)力研究對該病的預防和控製起著至(zhì)關重要的作用。本試驗擬以新疆天康畜牧生物技術股(gǔ)份有(yǒu)限公司生產的6批小反芻獸疫活疫苗為(wéi)基礎,對其進行最小免疫劑量、疫苗免(miǎn)疫(yì)期和疫苗保存期的研究。 1材料與方法 1.1生產用毒種 200701批PPR生產用基礎毒(dú)種,中國獸醫藥品監察所提供。 1.2生(shēng)產用細胞 Vero細胞,代次F151,中(zhōng)國獸醫(yī)藥品監察所(suǒ)提供。 1.3MEM 細胞(bāo)培養液(yè)GIBICO公司生產(批號(hào):41500-034)。 1.4試驗動物 1歲以上山羊和綿羊。 1.5其他(tā)常規試劑均由(yóu)中國獸(shòu)醫藥品監察(chá)所提供。 1.6疫(yì)苗製造 按文獻進行疫(yì)苗製造和質量檢驗,生(shēng)產用基礎(chǔ)毒種為200701批PPR毒種;生產用細胞為Vero細胞,代次為F157代;共生產小反芻獸疫活疫苗6批,批(pī)號分別為2007002、2007003、2007004、2007005、2007006、2007007 ,由新(xīn)疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產,經檢驗合格(gé)的疫苗用於效力研究試驗(yàn)。 1.7疫苗最小免疫劑量試驗 將2007002、2007003、2007004 批疫苗按文獻規定(dìng)的方法測定 PPR 病 毒(dú)含量,根據病毒含量測定結果,將其稀釋(shì)至每毫升 含 104 、103 、1 02 、101TCID 50 。每個劑量經頸部皮下免疫山羊和綿羊(yáng)各5隻,每隻羊接種1mL。免疫後21d采(cǎi)血測定血清中PPRV中和抗體效價。 1.8疫苗(miáo)免疫(yì)期試驗 根據最小免疫劑量(liàng)試(shì)驗結果,選取2007005、2007006、2007007批疫苗進行疫苗免疫期試驗(yàn)。將小反芻獸疫活疫(yì)苗根據PPR病毒含(hán)量檢測(cè)結果,用稀釋液稀釋至每毫(háo)升含1個免(miǎn)疫劑量(103TCID50/mL),經頸部皮下免疫健康山羊和綿羊,免疫(yì)後15個月和26個月分別采血測定小反(fǎn)芻獸疫病毒中和抗體。 1.9疫苗保存期試驗 將2007002、2007003、2007004批疫苗置 -20℃保(bǎo)存15個月後,按文獻規定的方法 進行疫苗(miáo)質(zhì)量檢驗。 表1 6批小反芻獸(shòu)疫活(huó)疫苗的質量檢驗結果 

備(bèi)注:“﹢”表示該項目檢驗結果為陽性(xìng),“-”表示該項目檢驗結(jié)果為陰性;病毒含量測定 結果為(wéi)TCID50/頭份;效力檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)為小反芻獸疫病毒中和(hé)抗體效價
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