動物布魯氏菌病診斷技術標準

動物布魯（lǔ）氏菌病診（zhěn）斷技術標準

GB/T18645—2002

1　範圍

本標準規定了動物布魯氏菌病的診（zhěn）斷技（jì）術。

本標準規定的虎紅平板凝集試驗、乳牛全乳環狀試驗適用於家畜布病田間篩選試驗和乳牛場布病的監測及診斷泌乳母牛（niú）布病的初篩試驗；試管凝（níng）集試驗和補體結合試驗適用於診斷羊種、牛種和豬種布病感染的家畜。本標準規定的試管（guǎn）凝集試驗不適用於犬種和綿羊（yáng）副睾種布病（bìng）感染家畜的檢疫。

2　虎紅平板凝集試（shì）驗

2.1　材料準備

2.1.1　抗（kàng）原、標準陽性血清、陰性（xìng）血清由（yóu）製標（biāo）單（dān）位提供，按說明書使用。

2.1.2　受檢血清應新鮮（xiān），無明顯蛋白凝塊（kuài），無溶血和無腐敗氣味。

2.1.3　潔淨的玻璃板（bǎn），其上劃分成4cm2的方格。

2.1.4　吸管或分裝器，適於滴加0.03mL。

2.1.5　牙簽或火柴（chái）杆，供攪拌用（yòng）。

2.2　操作方（fāng）法

2.2.1　將玻璃（lí）板（bǎn）上各格（gé）標記受檢血清號，然（rán）後加相應血清0.03mL。

2.2.2　在受檢血清（qīng）旁滴加（jiā）抗原0.03mL。

2.2.3　用牙簽類小棒攪動血清和抗原使之（zhī）混合。

2.2.4　每次試驗應設陰、陽性血清對照。

2.3　判定

2.3.1　在（zài）陰、陽性血清對照成立的條件下，方可對（duì）被檢血清進行判定。

2.3.2　受（shòu）檢血清在4min內出現肉眼可見凝集現象者判為陽性(+)，無凝集現象（xiàng），呈均勻（yún）粉紅色者判為陰性(—)。

3　乳牛布病全乳環狀試驗（yàn）

3.1　材料（liào）準備

3.1.1　布病全乳環狀抗原

由製標單位提供，按說明書使用（yòng）。

3.1.2　乳樣

3.1.2.1　受檢乳樣須為新鮮的全乳。

3.1.2.2　采乳樣時應將母畜的乳房用（yòng）溫水洗淨、擦幹，然後將乳液擠入潔淨的器皿中。

3.1.2.3　采集（jí）的乳（rǔ）樣夏季時應於當日內檢查；保存於2℃時，7d內仍可使用。

3.2　操作方法

3.2.1　取乳樣lml，加於滅（miè）菌凝集試驗（yàn）管內。

3.2.2　取充分振蕩混合均（jun1）勻的全乳環狀抗原1滴(約50ul)加人乳樣中充分（fèn）混勻。

3.2.3　置37℃一38℃水浴（yù）中（zhōng）60min。

3.2.4　加溫後取出（chū）試管勿使振蕩，立即進行判定。

3.3　判定

標準分為：

a)強（qiáng）陽性反應(+++)，乳（rǔ）柱上（shàng）層乳脂形成明顯（xiǎn）紅色的環帶，乳柱白色，臨界分明；

b)陽性反應(++)，乳脂層的（de）環帶呈紅色（sè），但不顯著（zhe），乳柱略帶顏色；

c)弱陽（yáng）性反應（yīng）(+)，乳脂層的環帶顏（yán）色較淺，但比乳柱顏色略深；

d)疑似反應(±)，乳脂層的（de）環（huán）帶顏（yán）色不明顯，與（yǔ）乳柱分界不（bú）清，乳柱不褪色；

e)陰性反應(—)，乳柱上層無任何變（biàn）化，乳柱顏色均勻。

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