牛結核病提純結核菌素變態反應試驗規程

1.原理

機體受到結核杆菌刺激時，導致T淋（lín）巴細胞轉變為（wéi）淋巴母細胞，並進而增殖分化為致敏淋巴細胞，使機體致敏；以後如再（zài）次接（jiē）觸結核菌時（結（jié）核菌素），致敏淋巴細胞即釋放出各種淋巴因子，一方麵使機體（tǐ）表現特異（yì）性的細胞（bāo）免疫，而另一方麵則發（fā）生遲發型變態反應，出現以單核細胞浸潤，以及由於巨噬細胞釋出溶酶體酶（méi）（水解酶）和淋（lín）巴細胞釋出淋巴毒素所引起的組織環死為特（tè）征的病理現象。

皮內注射提（tí）純結核菌（jun1）素（PPD）於正常動物，不出現顯著的局部炎症反應。相反，如（rú）果將其注入曾感染結核病而致敏的動物，便發（fā）生遲發型超敏感（gǎn）性應答，在幾小時之內注射局部不出現肉眼的或組織學的變化，但以後血管擴張，通透性增加，因而出現紅斑和水（shuǐ）腫，腫脹硬固。組織檢查，這種病變和典型的急性炎症反應不同的是，浸潤細胞主要是單核細胞，即巨噬（shì）細胞和淋巴細胞，雖然反（fǎn）應初期也出現短（duǎn）暫的嗜中性白細胞的積聚。注射後24-72小時反應程度最強，以後逐漸（jiàn）消退。非常嚴重（chóng）的反應，在注射局部可發生壞死。

2.器材與試劑 

酒精棉、卡尺、1-2.5ml注射器、針頭、牛型提純結核菌素。

3.操作方法

3.1注（zhù）射部位及術前處理（lǐ）：在頸側中部上1/3處剪毛（或提前一天剃毛），三個月（yuè）以內的犢牛，也可在肩胛部進行，直徑約10cm，用卡尺測量術部中央皮（pí）皺厚度，作好記錄。如（rú）術部有變化時，應另選部位或在對（duì）側進行。

3.2注射劑量：不論（lùn）大小（xiǎo）牛（niú）隻，一律皮內注射1萬（wàn）國際單位。即將牛型提純結核（hé）菌素（sù）稀釋成每毫升含10萬國（guó）際單位後，皮內注射0.1ml。如用2.5ml注射器，應再（zài）加等量注射用水皮內注射0.2ml。凍（dòng）幹菌素稀釋後應當天（tiān）用完。

3.3注射方法：先以75%酒精消（xiāo）毒術部，然後皮內注入定量的牛型提純結（jié）核菌素，注（zhù）射後局（jú）部應出（chū）現小泡，如注射（shè）有疑（yí）問時，應另選15cm以外的部位或（huò）對（duì）側（cè）重作。

3.4注射次數和觀察反應：皮內注射後經72小時判定（dìng），仔細觀察局部有無熱痛、腫脹等炎性反應，並以卡（kǎ）尺測量皮皺厚度（dù），作好記錄。對疑似反應牛應即在另一側以同一批菌素同一劑量進行第二回皮內注射，再經（jīng）72小時後觀（guān）察（chá）反應。如有可能，對陰性和疑似反應牛，於注射後96和120小時再分別觀察一次，以防個別牛出現較晚（wǎn）的遲發型變態反應。

3.5結果（guǒ）判定（dìng）：

3.5.1陽性反應：局部有明顯的（de）炎性反應（yīng）。皮厚差等於或大於4mm以上者，其記錄符號為（+）。對進出口（kǒu）牛的檢疫，凡皮厚差大於2mm者，均判為（wéi）陽性。

3.5.2疑似反應：局部炎性反應不明顯（xiǎn），皮厚差在2.1-3.9mm間，其記錄符號為（±）。

3.5.3陰性反應：無炎性反應。皮厚差在2mm以下，其（qí）記錄符（fú）號為（-）。

3.6凡判為疑似反應的牛隻，於第一次檢（jiǎn）疫30天（tiān）後進行複檢，其結果仍（réng）為可疑反應時，經30-45天後（hòu）再複檢，如仍為疑似，應判為陽性。

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